猪RPL28 基因的分离和功能的初步研究
 

摘要：目的：分离与大白×梅山猪正反向杂交组合亲子代间脂肪性状差异相关的基因RPL28并做功能上的初步研究。方法：利用mRNA 差异显示技术获得杂交猪个体及亲本在不同日龄间的差异显示EST。结合电脑克隆及RACE 技术克隆出差异表达基因RPL28 的全长。利用DNAStar、CLUSTALW 等软件对RPL28 基因的结构、所编码的蛋白质结构和功能等特征进行预测和分析。用定量和半定量PCR 对差异表达基因RPL 在大白猪×梅山猪杂交组合亲子代间基因表达情况及各组织间表达情况进行进一步鉴定。结果：分离到差异表达的基因RPL28。分析表明其RPL28 基因在杂种大梅和梅大猪中增强表达。并且猪RPL28 基因在各组织中均高表达，仅在肺和子宫中表达量略有降低。预测了该基因的结构及其所编码的蛋白质。结论：成功的分离出与脂肪有关的差异表达基因RPL28，并对其基因结构和功能上做了初步研究。
 

关键词：猪；脂肪组织； RPL28 基因；mRNA差异显示

0 引言
研究表明，脂肪组织除对组织器官起保护作用、保持体温以及缓冲机械压力等作用外，它还具有重要的内分泌功能。脂肪组织可以主动参与能量代谢的平衡〔1〕40 。中外猪种由于遗传背景、长期所处的地理环境以及所接受的饲养方式和选育方式等方面的不同，形成了各自的种质特性〔2〕。使其在脂肪相关性状方面存在很大的差异。而中外猪种杂交产生的杂种猪往往在脂肪相关性状等方面的表现要优于双亲，产生杂种优势〔3〕。这些差异以及杂种优势现象的产生应该与基因差异表达有关〔4〕。笔者利用纯种大白猪、梅山猪以及杂种大白×梅山、梅山×大白猪的胸腰椎连接处的背膘脂肪做mRNA 差异显示获得与脂肪差异表达相关的EST。利用电脑克隆技术和SMART技术获得了猪RPL28 的cDNA 全长序列。并在后期工作中对该基因的结构及功能做了研究。

4 结论
本实验通过差异显示PCR成功的分离了与脂肪相关的差异表达基因。并对该基因的组织表达差异做了鉴定。成功的解析了该基因的结构并预测了所编码的蛋白质结构及性质。为阐明猪RPL28 的表达调控机制奠定了基础。
 

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