【范文】高效快速凝胶电泳的基础研究
【作者】 龚盼盼；
【导师】 包建民；
【摘要】 平板凝胶电泳因为其简单的操作、低廉的成本,广泛应用于生物、微生物、分析等学科领域。聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳是常见的两类平板凝胶电泳形式。前者是以聚丙烯酰胺凝胶为电泳介质,主要用于分离蛋白质;后者是以琼脂糖凝胶为电泳介质,主要用于分离DNA。然而平板凝胶也存在着不可忽视的问题。电流的存在会在电泳过程中产生焦耳热。当焦耳热生成的速率大于传递至周围环境的速率时,热量在凝胶内部积累,使凝胶温度升高。当凝胶温度过高时会导致凝胶融化、样品条带扭曲甚至使样品变性。因此,电泳过程中的焦耳热限制了电泳电压;带电粒子在凝胶内部迁移的快慢与电泳电压正相关,所以,焦耳热的产生,限制了带电粒子在凝胶中的电泳速度。通常,电泳电压不超过5 v/cm,凝胶温度不高于35℃,电泳时间需要一个小时甚至更长。本课题在凝胶的外围设置一个较低温度的环境,通过热量传递,将电泳过程中产生的焦耳热移除。通过这一方法,可以增大电泳电压,提高电泳速度,降低电泳时间,从而达到高效快速的目的。实验初期,自制电泳槽,包括含内制冷和外制冷电泳槽。首先进行了实验思路的验证,之后进行一系列因素的考察和条件优化。在实验中,通过监测凝胶温度的...
【Abstract】 Gel electrophoresis is more and more popular in the biological and analytical laboratories due to its convenience and simpliness. Agarose gel electrophoresis and polyacrylamide gel electrophoresis are the two most important gel electrophoresis technologies. Agarose gel electrophoresis is usually used to separate DNA, and poiyacrylamide gel electrophoresis is usually uesd to separate proteins.However, electric current produces Joule heat in the process of electrophoresis. Joule heat is related to...
【关键词】 凝胶电泳； 焦耳热； 制冷； 电泳速度；
【Key words】 gel electrophoresis； Joule heat； refrigeration； electrophoresis；
【范文目录】
中文摘要 3-4
ABSTRACT 4
第一章 文献综述 7-25
    1.1 电泳 7-8
    1.2 凝胶电泳 8-10
    1.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 10-15
        1.3.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离原理 10-12
        1.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测原理 12-14
        1.3.3 电泳系统的选择 14-15
    1.4 琼脂糖凝胶电泳 15-21
        1.4.1 琼脂糖凝胶电泳分离原理 15-16
        1.4.2 琼脂糖凝胶电泳检测原理 16-19
        1.4.3 电泳系统的选择 19-21
    1.5 热传递 21-25
        1.5.1 热传导 21-22
        1.5.2 热对流 22-23
        1.5.3 热辐射 23-25
第二章 实验思路探索与模型建立 25-38
    2.1 引言 25
    2.2 实验思路探索 25-33
        2.2.1 试剂和试液 25-27
        2.2.2 仪器和设备 27-30
        2.2.3 实验操作 30
        2.2.4 实验结果 30-32
        2.2.5 实验结论 32-33
    2.3 建立模型 33-38
        2.3.1 模型原理 33-35
        2.3.2 模型制作 35-38
第三章 模型因素优化与样机考察 38-54
    3.1 引言 38
    3.2 模型因素优化 38-50
        3.2.1 试剂和试液 38-40
        3.2.2 制冷温度 40-42
        3.2.3 制冷仪功率 42-44
        3.2.4 制冷材料 44-45
        3.2.5 是否使用缓冲液载体 45-47
        3.2.6 缓冲液载体选择 47-49
        3.2.7 缓冲液体系选择 49-50
    3.4 样机考察 50-54
        3.4.1 制冷效果评估 51
        3.4.2 应用实验 51-53
        3.4.3 稳定性评估 53
        3.4.4 样机评估小结 53-54
第四章 模型Ⅱ设计及样机考察 54-67
    4.1 引言 54-55
    4.2 模型Ⅱ原理 55-57
        4.2.1 电泳槽原理 55-56
        4.2.2 检测原理 56-57
    4.3 模型Ⅱ制作 57-62
    4.4 模型Ⅱ因素考察 62-63
        4.4.1 制冷效果 62-63
        4.4.2 可见光检测效果 63
    4.5 样机Ⅱ考察 63-67
        4.5.1 制冷效果评估 64
        4.5.2 应用实验 64-66
        4.5.3 稳定性评估 66
        4.5.4 样机Ⅱ小结 66-67
第五章 结论与展望 67-68
    5.1 结论 67
    5.2 展望 67-68
参考文献 68-71