五味子果实和藤茎中木脂素含量测定
张鑫瑶，马培，许利嘉，彭勇，肖培根**
作者简介：张鑫瑶（1987），女，实验员
通信联系人：许利嘉（1978），女，副研究员，药用植物活性成分研究. E-mail: ljxu@ implad.ac.cn
（中国医学科学院 中国协和医科大学药用植物研究所，北京 100193）
摘要：【目的】5 对不同产地北五味子果实和藤茎中五味子醇甲等6 个木脂素类成分含量进行
测定。【方法】色谱柱为AgilentXDB-C18 色谱柱（5μm 4.6×250mm）；流动相：乙腈-酸
水二元梯度洗脱。检测波长：250nm。流速：0.8ml/min。柱温：30℃。【结果】不同产地、
不同部位间的个别成分差异较明显。五味子果实中酯甲和甲素的含量明显高于藤茎,而五味
子藤茎中醇乙含量则高于果实。【结论】本方法简便、准确、重现性好，可作为不同来源五
10 味子的质量控制标准。
关键词：北五味子；木脂素; 含量测定
 五味子始载于《神农本草经》[1]，性温，味酸、甘，归肺、心、肾经，是我国的一种常
30 用中药，中华人民共和国药典2010版一部收载五味子（Schisandra chinensis）干燥果实作为
中药五味子的来源[2]，主要功效为益气滋肾、生津敛汗、涩精止泻、宁心安神。在我国民间
五味子科植物的藤茎也作药用，主要功效为活血化淤、祛风除湿[3]。据报道，五味子科植物
果实和藤茎中均含有木脂素类成分[4-6]，木脂素是五味子科植物的主要生理活性成分[7]，具
有抑制血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶的升高、抗自由基氧化和保肝的作用[8-9]。五味子中
35 木脂素成分主要为五味子甲素(Deoxyschisandrin)、五味子乙素(Schizandrin B)、五味子丙素
(Schisandrin C)、五味子醇甲(Schisandrol A)、五味子醇乙(Schisandrol B)、五味子酯甲
(Schisantherrin A)、五味子酯乙（Schisantherrin B)等。笔者利用高效液相色谱法测定了不同
产地五味子果实和藤茎中6种木脂素（五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、
五味子乙素、五味子丙素）的含量。通过对不同五味子果实和藤茎中木脂素含量的比较，为
40 五味子资源的开发、利用及质量控制提供更多的科学依据。
 1 仪器与试药
安捷伦1200 型高效液相色谱仪（包括G1311A 四元泵、G1329A 自动进样器、G1316A
柱温箱、G1315B DAD 检测器，美国Agilent 公司）；梅特勒电子分析天平（AL204）；超
45 声波清洗仪（天津恒奥科技发展有限公司，HS10260D）。五味子药材来源见表1。五味子
醇甲、五味子甲素（中国药品生物制品检定所，批号分别为110857-200709、 110764-200609
含量测定用）；五味子醇乙、五味子酯甲、五味子乙素、五味子丙素（上海融禾医药科技有
限公司，批号分别为110317、101226、110105、101226 含量测定用）。乙腈、乙酸（色谱
纯），水为娃哈哈纯净水，其它试剂均为分析纯（北京化工厂）。
50
表1 样品来源
Tab.1 The source of sample
编号 产地 部位 编号 产地 部位
1 内蒙古 果实 4 内蒙古 藤茎
2 辽宁 果实 5 辽宁 藤茎
3 吉林 果实 6 北京 藤茎
2 方法与结果
2.1 色谱条件的研究
55 色谱柱：AgilentXDB-C18 色谱柱（5μm 4.6×150mm）。流动相：乙腈-酸水（0.1%乙酸）
二元梯度洗脱（0～9min，48～48%乙腈；9～15min，48～55%乙腈；15～20min,55～65%乙
腈；20～30min,65～80%乙腈；30～40min,80～100%乙腈；40～45min,100%乙腈）。检测波
长：250nm。流速：0.8ml/min。柱温：30℃。进样量：3μl。
2.2 溶液的制备
60 2.2.1 对照品溶液的制备
分别精密称取五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲对照品5.00、5.00、1.00mg，置
于同一10ml 容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，过滤（经0.45μl 针头滤器），取续滤液作为
混标对照品溶液A；分别精密称取五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素对照品6.25、5.20、
5.30mg，置于同一100ml 容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，过滤（经0.45μl 针头滤器），
65 取续滤液作为混标对照品溶液B。
2.2.2 供试品溶液的制备
取五味子1 号样打碎研粉，过3 号筛，精密称取粉末1g，精密加入于75%乙醇10ml，
精密称取重量，超声处理30min，取出，放至室温，用75%乙醇补足缺失的重量，摇匀，过
滤（经0.45μl 针头滤器），取续滤液即得供试品溶液。
70 2.3 线性关系考察
分别精密量取混标对照品溶液A、B 各1ml，分别稀释1 倍，依次类推各制成五个浓
度的混标对照品溶液，分别精密吸取3μl 注入液相色谱仪。结果见表2，色谱图见图1。
 表2 线性回归方程及线性范围
Tab. 2 Linear regression e 75 quation and linearity range
回归方程 线性范围（μg）
五味子醇甲 y=7269x+34.54 R²=0.9998 0.09～1.50
五味子醇乙 y=5602x+52.41 R²=0.9997 0.09～1.50
五味子酯甲 y=5212x+11.92 R²=0.9996 0.02～0.30
五味子甲素 y=4962x+0.137 R²=0.9999 0.01～0.16
五味子乙素 y=23526x+25.44 R²=0.9996 0.01～0.19
五味子丙素 y=4886x-1.941 R²=0.9995 0.01～0.16
图1 标准品及样品色谱图
Fig. 1 HPLC Fingerprint of standards and sample
80 上为混标色谱图，下为供试品色谱图
1.五味子醇甲 2.五味子醇乙 3.五味子酯甲 4.五味子甲素 5.五味子乙素 6.五味子丙素
2.4 重现性实验
按供试品溶液制备的方法，平行制得五份供试品溶液，分别精密吸取3μl，注入液相色
谱仪检测五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素的
85 峰面积积分值。结果，RSD 分别为1.95%、1.62%、1.57%、2.04%、1.76%、1.97%，表明重
现性良好。
2.5 精密度实验
精密吸取同一供试品溶液3μl，重复进样5 次，检测器五味子醇甲、五味子醇乙、五味
子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素的峰面积积分值。结果，RSD 分别为0.69%、
90 0.19%、0.72%、1.24%、0.55%、1.61%，表明精密度良好。
2.6 稳定性实验
精密吸取同一供试品溶液3μl，分别于制备后0、2、4、8、24 小时后进样，测定五味
子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素的峰面积积分值。
结果，RSD 分别为0.82%、0.32%、1.40%、1.58%、0.58%、1.67%，表明供试品溶液在24
95 小时内基本稳定。
2.7 回收率实验
精密称取五味子醇甲3.61mg,置于10ml 容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，过滤（经0.45μl
针头滤器），取续滤液作为储备液A；分别精密称取五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、
 五味子乙素、五味子丙素7.90、3.40、9.10、4.00、3.00mg,置于同一100ml 容量瓶中，加甲
醇至刻度，摇匀，过滤（100 经0.45μl 针头滤器），取续滤液作为储备液B。精密称取储备液A、
B 各1ml 加入三角瓶中，挥干溶剂，加入精密称取的五味子1 号样粉末1g 分别置于10ml
上述三角瓶中，精密加入于75%乙醇10ml，精密称取重量，超声处理30min，取出，冷却
至室温，用75%乙醇补足缺失的重量，摇匀，过滤（经0.45μl 针头滤器），取续滤液即得
回收率试验供试品溶液，平行操作此过程，制得六份回收率试验供试品溶液，分别测定五味
105 子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素的含量，计算回
收率，结果见表3。
表3 加样回收实验
Tab.3 Sample recovery test……
五味子醇甲 五味子醇乙五味子酯甲五味子甲素五味子乙素 五味子丙素
平均回收率% 100.59 102.68 105.63 104.79 105.12 103.58
RSD% 2.05 1.99 2.63 2.78 2.53 2.13
2.8 样品的测定
110 取该样品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，测定五味子醇甲、五味子醇乙、五味
子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素含量。结果见表4。
表4 木脂素的含量
Tab.4 Contents of lignans
五味子醇甲
（%）
五味子醇乙
（%）
五味子酯甲
（%）
五味子甲素
（%）
五味子乙素
（%）
五味子丙素
（%）
总量
（%）
1
2
3
4
5
0.361
0.427
0.418
0.288
0.273
0.079
0.136
0.162
0.234
0.304
0.034
0.047
0.029
0.006
—
0.091
0.169
0.111
0.040
0.046
0.040
0.065
0.051
0.042
0.034
0.030
0.031
0.037
0.042
0.010
0.635
0.875
0.808
0.652
0.667
6 0.175 0.210 — 0.029 0.028 0.021 0.463
115 3 讨论
3.1 本实验分别用75%甲醇、甲醇、75%乙醇、乙醇作提取溶剂，0.5 h 和1h 作提取时间，
超声和热回流作提取方式，观察不同提取条件所获得的图谱，结果表明，75%醇超声提取
0.5 h 提取效率较高且方法简便易操作。
本实验分别考察了甲醇-水、甲醇-乙酸水、乙腈-水和乙腈-乙酸水4个流动相系统，结果表明
120 采用乙腈-酸水（0.1%乙酸）流动相系统时，分离度较好且基线平稳，便于指纹图谱的分析，
因此最终采用乙腈-酸水（0.1%乙酸）系统作为流动相系统。
本实验采用DAD检测器作全波长扫描并结合以往研究，发现250nm处各成分具有较好的紫外
吸收，色谱信息丰富，分离度较好，因此最终确定了250nm为本实验的检测波长。
3.2 该实验利用高效液相色谱法建立了测定北五味子中6种木脂素类成分的分析方法。实验
125 结果表明，该方法分离效果好，分离度高，且实验方法操作简单，灵敏快速，对五味子的开
发、资源利用及其质量控制提供了依据。
3.3 从表4 的含量测定结果中可以看出，辽宁产五味子果实中木脂素成分含量相比其他两
个产地较高，而辽宁产五味子藤茎中木脂素成分含量相比其他两个产地并无明显优势。果实
中五味子酯甲和甲素的含量明显高于藤茎中的，而值得注意的是藤茎中五味子醇乙的含量高
130 于果实，为五味子药材资源新的利用提供了理论依据。